microRNA PCR實驗代測

microRNA PCR簡介

microRNA ( miRNA )是一種機體內(nèi)源性表達的單鏈小分子 RNA ,位于基因組非編碼區(qū),本身不具有開放閱讀框( open reading frame , ORF ),具有高度保守性,時序性和組織特異性。miRNA廣 泛存在于各種真核細胞中,不編碼任何蛋白質(zhì),長度僅為20～24nt.成熟的miRNA 5端有一個磷酸基團,3端為羥基,由具有發(fā)夾狀結(jié)構(gòu)的約70 ～ 90nt的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后形成。成熟的miRNA形成RNA誘導的基因沉默復合體( RNA-induced silencing complex , RISC )作用于靶點mRNA ,通過對mRNA剪切或抑制其翻譯過程而調(diào)控基因的表達。目前人們還不明確miRNA及其靶mRNA之間的作用機制。

microRNA PC實驗說明：

1、大部分基因特征前綴為：MIR；

2、需要確認基因是3p還是5p；

實驗室操作注意事項：

1.實驗時根據(jù)試驗的情況和性質(zhì)進行必要的防護。根據(jù)試驗可能發(fā)生的危險事故佩戴必要的防護工具，例如穿好試驗服，戴橡膠手套，防護面具，防毒面具等。實驗前，要注意清理試驗場周圍的安全隱患。檢查試驗裝置、藥品和相關(guān)物品是否有不符合要求的情況等。

2.遵循化學藥品的性質(zhì)和化學反應(yīng)的規(guī)律，不盲目蠻干和主觀臆測化學反應(yīng)的過程。應(yīng)根據(jù)化學反應(yīng)的性質(zhì)和過程選擇匹配的反應(yīng)裝置，不可圖省事省去必要的安全措施。

3.經(jīng)常估計到實驗的危險性

實驗事故雖不可預測，但其危險性的大小是可以估計到的。即使對不大了解的實驗，也必須推測其危險程度而制訂相應(yīng)的預防措施。象下面這類實驗，必須十分注意。

①不了解的反應(yīng)及操作;

②存在多種危險性的實驗(如發(fā)生火災(zāi)、毒氣等);

③在嚴酷的反應(yīng)條件(如高溫、高壓等)下進行的實驗。

4.充分作好發(fā)生事故時的預防措施并加以檢查。

平時注意熟悉需要關(guān)閉的主要龍頭、電氣開關(guān)，滅火器的位置及操作方法，避免發(fā)生事故時才四處尋找應(yīng)急的物品。

5.實驗的后處理。實驗的后處理工作，亦屬實驗過程的組成部份。特別不可忽略回收溶劑和廢液、廢棄物等的處理。

microRNA PCR實驗代測